4-Nitrofenil beta-D-galaktopiranozid CAS:200422-18-0

Täsiri: ONPG, β-galaktozidaza fermentiniň bardygyny we işjeňligini anyklamak üçin ýörite ulanylýan substratdyr. β-galaktozidaza fermenti bar bolanda we işjeň bolanda, ol ONPG-ni iki önüme bölýär: o-nitrofenol we galaktoza türewi. O-nitrofenolyň bölünip çykmagy sary reňkiň üýtgemegine getirýär, ony spektrofotometr arkaly ölçäp bolýar.

Ulanylyşy: ONPG molekulýar biologiýa we biohimiýa barlaglarynda birnäçe ulanylyşy bar:

β-galaktozidaza işjeňligini kesgitlemek: ONPG adatça β-galaktozidaza fermentiniň işjeňligini ölçemek we kesgitlemek üçin ulanylýar. Fermentiň işjeňligine gönüden-göni proporsional bolan o-nitrofenol emele gelme tizligini spektrofotometriki usulda ölçäp bolýar.

Gen ekspresiýasy we düzgünleşdirilişi: ONPG köplenç gen ekspresiýasy we düzgünleşdirilişi bilen baglanyşykly tejribelerde ulanylýar. Ol köplenç belli bir promotorlaryň gözegçiligi astynda genleriň ekspresiýasyny öwrenmek üçin umumy ulanylýan lacZ ekzosistem ulgamy ýaly birleşme belok synaglarynda ulanylýar. ONPG arkaly ölçenen beta-galaktozidaza işjeňligi gen ekspresiýasynyň derejesine düşünmäge mümkinçilik berýär.

β-galaktozidaza işjeňligini barlamak: ONPG rekombinant DNK tehnologiýasynda β-galaktozidazany kodlaýan LacZ geniniň bardygyny we funksiýasyny anyklamak üçin kolorimetrik barlamak usuly hökmünde ulanylyp bilner. Bu barlamak usuly gyzyklanýan genini öz içine alýan klonlary anyklamaga kömek edýär.

Ferment kinetikasyny öwrenmek: ONPG β-galaktozidaza fermentiniň kinetikasyny öwrenmekde hem peýdalydyr. Dürli substrat konsentrasiýalarynda ferment-substrat reaksiýasynyň tizligini ölçemek arkaly Mihaelis-Menten sabitleri (Km) we iň ýokary reaksiýa tizlikleri (Vmax) ýaly kinetiki parametrleri kesgitlemek mümkin.