4-Nitrofenil beta-D-galaktopyranozid CAS: 200422-18-0

Effekt: ONPG β-galaktosidaza fermentiniň bardygyny we işjeňligini kesgitlemek üçin ýörite ulanylýan substratdyr.--Galaktosidaza fermenti bar we işjeň bolanda, ONPG-ni iki önüme bölýär: o-nitrofenol we galaktoza önümi.O-nitrofenolyň boşadylmagy, spektrofotometr bilen ölçenip boljak sary reňk üýtgemegine getirýär.

Programma: ONPG molekulýar biologiýa we biohimiýa gözleginde birnäçe amaly bar:

--Galaktosidaza işjeňligini kesgitlemek: ONPG, adatça, β-galaktosidaza fermentiniň işjeňligini ölçemek we bahalandyrmak üçin ulanylýar.Fermentleriň işjeňligine gönüden-göni proporsional bolan o-nitrofenolyň emele geliş tizligini spektrofotometrik ölçäp bolýar.

Gen aňlatmasy we kadalaşdyrylyşy: ONPG köplenç gen aňlatmasy we kadalaşdyryş barlaglary bilen baglanyşykly synaglarda ulanylýar.Genörite mahabatçylaryň gözegçiligi astyndaky genleriň aňladylyşyny öwrenmek üçin, köplenç ulanylýan lacZ birleşdiriş ulgamy ýaly birleşdirilen belok analizlerinde köplenç ulanylýar.ONPG ulanyp ölçenen beta-galaktosidaza işjeňligi gen aňlatmagyň derejesi barada düşünje berýär.

--Galaktozidaz işjeňligini barlamak: ONPG rekombinant DNK tehnologiýasynda color-galaktosidazany kodlaýan LacZ geniniň bardygyny we işleýşini kesgitlemek üçin kolorimetriki barlag usuly hökmünde ulanylyp bilner.Bu barlag usuly, gyzyklanma genini öz içine alýan klonlary kesgitlemäge kömek edýär.

Ferment kinetikasyny öwrenmek: ONPG β-galaktosidaza fermentiniň kinetikasyny öwrenmekde hem peýdalydyr.Dürli substrat konsentrasiýalarynda ferment-substrat reaksiýasynyň tizligini ölçemek bilen, Maýklis-Menten yzygiderliligi (Km) we iň ýokary reaksiýa derejesi (Vmax) ýaly kinetiki parametrleri kesgitlemek bolýar.