Iň amatly konsentrasiýany nädip kesgitlemeli?
Induktor IPTG (izopropil-beta-d-tiogalaktozid) üçin konsentrasiýa näçe ýokary bolsa, şonça gowy.Iň amatly konsentrasiýa, belli bir synag şertlerine we islenýän induksiýa täsirine baglydyr.
Adatça, IPTG konsentrasiýasy 0,1-1 mM aralygynda ulanylýar.Pes konsentrasiýalar öýjükleriň ösmegine ýaramaz täsirleri azaldyp biler we maksatly beloklaryň aşa aşa gysylmagy sebäpli sitotoksikligi azaldyp biler.Higherokary konsentrasiýa öýjükleriň köpelmegine we aňlatmagyň netijeliligine täsir edip, öýjükleriň alyş-çalyş ýagdaýyna sebäp bolup biler.
Iň amatly konsentrasiýany kesgitlemegiň usuly, dürli konsentrasiýalarda IPTG induksiýa synaglaryny geçirip, maksatly belogyň aňlatma derejesine baha bermek bolup biler.Kiçi göwrümli medeni synaglar, IPTG konsentrasiýalarynyň bir toparyny (meselem, 0,1 mM, 0,5 mM, 1 mM we ş.m.) ulanyp amala aşyrylyp bilner we dürli konsentrasiýalarda aňlatma täsiri maksatly belogyň aňlatma derejesini kesgitlemek arkaly bahalandyrylyp bilner (mysal üçin Günbatar blot ýa-da floresan kesgitlemek).Synag netijelerine görä, iň oňat aňlatma effekti bilen konsentrasiýa iň amatly konsentrasiýa hökmünde saýlandy.
Mundan başga-da, şuňa meňzeş synag şertlerinde giňden ulanylýan IPTG konsentrasiýa diapazonyna düşünmek üçin degişli edebiýata ýa-da beýleki barlaghanalaryň tejribesine ýüz tutup bilersiňiz, soňra synag zerurlyklaryna görä optimizirläp we sazlap bilersiňiz.
Iň amatly konsentrasiýanyň dürli aňlatma ulgamlaryna, maksatly beloklara we synag şertlerine baglylykda üýtgäp biljekdigini bellemelidiris, şonuň üçin her ýagdaýa görä optimizirlemek iň gowusydyr.
Iş wagty: 28-2023-nji sentýabr